LUYOR-3109高強(qiáng)度紫外催化光源促銷
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021-64195798作者:生命科學(xué)事業(yè)部時(shí)間:2019-09-27 08:46:37瀏覽5551 次
斑馬魚模式生物的使用正逐漸拓展和深入到生命體的多種系統(tǒng)(例如,神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等)的發(fā)育、功能和疾病(例如,神經(jīng)退行性疾病、遺傳性心血管疾病、糖尿病等)的研究中,并已應(yīng)用于小分子化合物的大規(guī)模新藥篩選。
斑馬魚身體延長(zhǎng)而略呈紡錘形,頭小而稍尖,吻較短,全身布滿多條深藍(lán)色縱紋似斑馬,與銀白色或金黃色縱紋相間排列紋路比較有條理。在水族箱內(nèi)成群游動(dòng)時(shí)猶如奔馳于非洲草原的斑馬群,故此得斑馬魚之美稱。斑馬魚和人類基因有著87%的高度同源性,作為模式生物的優(yōu)勢(shì)很突出,這意味著其實(shí)驗(yàn)結(jié)果大多數(shù)情況下適用于人體。常可用于水質(zhì)環(huán)境的監(jiān)測(cè)。斑馬魚也是比較好養(yǎng)的一種魚。
俗稱“花條魚”、“藍(lán)條魚”。魚綱,鯉科。原產(chǎn)印度和孟加拉。為一種性情活潑、不怕冷的熱帶魚品種。體呈長(zhǎng)菱形,身長(zhǎng)約5厘米左右,尾部側(cè)扁。雌魚體較寬,腹部膨大,臀鰭淡黃色;雄魚體較窄,體黃色,背部橄欖色,從背部至尾部和臀鰭,上有數(shù)條深藍(lán)色條紋直達(dá)尾鰭,全身?xiàng)l紋似斑馬紋,因而得名。尾鰭深叉形。各鰭黃色透明。由于條紋的多少和寬窄不同,以及鰭的差異,形成各個(gè)不同品種。斑馬魚對(duì)水溫的變化有較強(qiáng)的抵抗力,只要水溫不低于20℃即能生活,最適生長(zhǎng)溫度25℃。對(duì)各種動(dòng)物性餌料或干飼料,都能食用。斑馬魚性情溫和,喜結(jié)群游動(dòng)。一般6月齡性成熟。卵生。
斑馬魚由于具有養(yǎng)殖簡(jiǎn)單、胚胎透明、體外受精、體外發(fā)育、發(fā)育迅速、性成熟周期短、產(chǎn)卵量大、轉(zhuǎn)基因和突變品系眾多、遺傳學(xué)工具成熟等諸多優(yōu)點(diǎn),近年來已成為研究脊椎動(dòng)物發(fā)育、人類疾病、環(huán)境科學(xué)、水產(chǎn)育種等的新興模式動(dòng)物。
在斑馬魚中,有多達(dá)1萬(wàn)個(gè)以上的遺傳突變品系,這些突變品系的建立大多是利用物理化學(xué)方法誘導(dǎo)或反轉(zhuǎn)錄病毒插入誘變導(dǎo)致基因組產(chǎn)生突變,之后再經(jīng)由多次的子代篩選所得。這些突變種的表型包含如胚層分化、組織器官發(fā)育和再生、生理調(diào)控與行為學(xué)等多方面,可提供科研人員的正向遺傳學(xué)材料來進(jìn)行相關(guān)生命科學(xué)和健康科學(xué)的研究。
另外在斑馬魚系統(tǒng)中也能方便地應(yīng)用若干反向遺傳學(xué)工具,譬如阻斷基因功能的工具-morpholino,以及建立了便捷的TALEN基因敲除和CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)等。
在研究中,將正向遺傳學(xué)與反向遺傳學(xué)的方法加以巧妙結(jié)合和利用,可以快速和正確地推導(dǎo)出生命過程的分子機(jī)制。
斑馬魚資源中心可以提供各類斑馬魚轉(zhuǎn)基因和突變品系,以及特定轉(zhuǎn)基因和突變品系的定制服務(wù)。
斑馬魚形態(tài):斑馬魚體長(zhǎng)4~6厘米。體呈紡錘形。背部橄欖色,體側(cè)從鰓蓋后直伸到尾未有數(shù)條銀藍(lán)色縱紋,臀鰭部也有與體色相似的縱紋,尾鰭長(zhǎng)而呈叉形。雄魚檸檬色縱紋;雌魚的藍(lán)色縱紋加銀灰色縱紋。
斑馬魚的雌雄鑒別:雄斑馬魚:魚體修長(zhǎng),鰭大,體色偏黃,臀鰭呈棕黃色,條紋顯著;雌魚:魚體較肥大,體色較淡,偏藍(lán),臀鰭呈淡黃色,懷卵期魚腹膨大明顯。
在國(guó)際上,斑馬魚模式生物的使用正逐漸拓展和深入到生命體的多種系統(tǒng)(例如,神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等)的發(fā)育、功能和疾病(例如,神經(jīng)退行性疾病、遺傳性心血管疾病、糖尿病等)的研究中,并已應(yīng)用于小分子化合物的大規(guī)模新藥篩選。我國(guó)開展斑馬魚相關(guān)的研究無(wú)論在規(guī)模還是在重視程度上都遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于國(guó)際形勢(shì)發(fā)展的需要。推動(dòng)和發(fā)展斑馬魚模式生物在我國(guó)生命科學(xué)研究中的廣泛使用是本中心的宗旨。在科技部重大科學(xué)研究計(jì)劃的支持下,我們匯集優(yōu)勢(shì),整合我國(guó)現(xiàn)有的斑馬魚主要研究力量,在未來幾年內(nèi)逐步建立全國(guó)共享的斑馬魚模式動(dòng)物研究技術(shù)和資源庫(kù),向國(guó)內(nèi)同行提供斑馬魚資源、信息和技術(shù)支撐。本著提高服務(wù)效率和質(zhì)量為原則,我們?cè)谏虾:捅本┓謩e建立斑馬魚模式動(dòng)物南方中心和北方中心。南方中心依托于中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院,北方中心依托于北京大學(xué)和清華大學(xué)。兩個(gè)中心本著優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的原則,共同開發(fā)研究技術(shù)和資源,以輻射狀向國(guó)內(nèi)研究人員提供服務(wù),積極推進(jìn)我國(guó)斑馬魚相關(guān)科學(xué)研究。
主要技術(shù)和資源服務(wù)內(nèi)容:
1)斑馬魚基因表達(dá)分析服務(wù):包括抽提斑馬魚基因組DNA和總RNA,核酸原位雜交探針制備和純化,全胚胎原位雜交技術(shù),顯微注射技術(shù),基因過表達(dá)(over-expression)和基因下調(diào)(morpholino knockdown)技術(shù)
2)斑馬魚轉(zhuǎn)基因技術(shù)服務(wù):包括各類斑馬魚非特異性和組織特異性啟動(dòng)子的克隆,基因組BAC文庫(kù)篩選與修飾,基于Tol2轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒的構(gòu)建,以及子一代轉(zhuǎn)基因系的篩選和保存
3)斑馬魚基因功能活體檢測(cè)服務(wù):包括清醒斑馬魚在體共聚焦/雙光子顯微鏡成像技術(shù)和在體電生理記錄技術(shù)
4)動(dòng)物行為范式分析服務(wù):包括感覺相關(guān)的應(yīng)激行為、視覺運(yùn)動(dòng)行為、學(xué)習(xí)記憶行為和藥物成癮行為等
5)斑馬魚基因突變技術(shù)服務(wù):包括插入誘變和ENU化學(xué)誘變技術(shù)。
6)斑馬魚轉(zhuǎn)基因資源庫(kù)和突變體資源庫(kù)服務(wù):包括研制、收集和分發(fā)各種斑馬魚轉(zhuǎn)基因品系和突變體
7)信息服務(wù):包括建立斑馬魚資源信息網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)和提供斑馬魚基因組生物信息學(xué)分析服務(wù)。
轉(zhuǎn)基因斑馬魚的制備主要采用兩種方法:通過Tol2轉(zhuǎn)座子構(gòu)建組織特異性表達(dá)報(bào)告基因的方法;利用特定基因的啟動(dòng)子/增強(qiáng)子驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因在特定細(xì)胞組織中表達(dá)的方法。首先構(gòu)建以Tol2轉(zhuǎn)座子為基礎(chǔ)的enhancer trap載體,報(bào)告基因選用GFP或RFP,最小啟動(dòng)子來自斑馬魚gata2基因;將上述載體與體外轉(zhuǎn)錄得到的Tol2轉(zhuǎn)座酶的mRNA共同注射到斑馬魚的單細(xì)胞受精卵中,受精卵長(zhǎng)大后成為founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,從中挑選出對(duì)于報(bào)告基因具有組織特異性表達(dá)模式的胚胎,拍照記錄后分類培養(yǎng);F1長(zhǎng)大后通過linker-mediated PCR的方法鑒定對(duì)應(yīng)于GFP(或RFP)表達(dá)圖式的Tol2插入位點(diǎn),并通過與已知基因組數(shù)據(jù)比較,對(duì)插入位點(diǎn)進(jìn)行定位與分析;通過外交純化得到轉(zhuǎn)基因魚,直至得到只含有單個(gè)插入品系的轉(zhuǎn)基因魚。通過克隆特定基因的啟動(dòng)子/增強(qiáng)子或BAC修飾法構(gòu)建在特定組織器官或特定胚胎發(fā)育階段表達(dá)報(bào)告基因的轉(zhuǎn)基因品系。BAC方法如下:在斑馬魚基因組計(jì)劃網(wǎng)站上通過BLAST將感興趣的基因定位到已知的contig上,并通過contig信息尋找包含所選基因的BAC ID號(hào);通過同源重組的方法對(duì)上述BAC克隆進(jìn)行修飾,將報(bào)告基因引入原有的BAC克隆;將修飾過的BAC克隆通過顯微注射的方法引入斑馬魚受精卵,連續(xù)觀察并挑選具有特異表達(dá)模式的轉(zhuǎn)基因魚;將上述成魚外交得到F1代,在F1代中篩選具有特異表達(dá)模式的成魚,即得到所需的轉(zhuǎn)基因品系。
國(guó)際斑馬魚中心
中心主任:
孫永華,博士,研究員,專業(yè)方向:魚類發(fā)育與生物技術(shù);總體負(fù)責(zé)斑馬魚資源中心(CZRC)建設(shè)和運(yùn)行。
專業(yè)技術(shù)人員:
潘魯湲,博士,工程師,CZRC業(yè)務(wù)主管。負(fù)責(zé)CZRC日常管理,包括資源引進(jìn)、資源保藏、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)培訓(xùn)、信息支撐等。
李闊宇,碩士,實(shí)驗(yàn)師,CZRC財(cái)務(wù)及對(duì)外資源服務(wù)主管。負(fù)責(zé)CZRC日常采購(gòu)、財(cái)務(wù)、對(duì)外資源服務(wù)以及養(yǎng)殖系統(tǒng)管理等。
熊 鳳,博士,工程師,轉(zhuǎn)基因技術(shù)專家。主要負(fù)責(zé)CZRC引進(jìn)資源的遺傳鑒定、轉(zhuǎn)基因技術(shù)服務(wù)、以及相應(yīng)的分子和細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)支撐及培訓(xùn)等。
謝訓(xùn)衛(wèi),碩士,助理實(shí)驗(yàn)師,基因敲除技術(shù)專家。主要負(fù)責(zé)CZRC資源引進(jìn)的信息收集、基因敲除技術(shù)服務(wù)、以及相應(yīng)的細(xì)胞和發(fā)育生物學(xué)技術(shù)支撐和培訓(xùn)等。
柳力月,碩士,實(shí)驗(yàn)師,魚病技術(shù)專家。主要負(fù)責(zé)CZRC養(yǎng)殖系統(tǒng)的魚病監(jiān)測(cè)及健康養(yǎng)殖體系的建立、品系傳代、養(yǎng)殖健康及細(xì)胞系提供服務(wù)、以及相應(yīng)的細(xì)胞學(xué)和魚病學(xué)技術(shù)支撐和培訓(xùn)等。
張 昀,碩士,助理實(shí)驗(yàn)師,數(shù)據(jù)庫(kù)和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)專家。主要負(fù)責(zé)CZRC數(shù)據(jù)庫(kù)和網(wǎng)絡(luò)的建設(shè)以及維護(hù)、以及相應(yīng)的技術(shù)支撐和培訓(xùn)等。
李玲璐,碩士,研究助理。負(fù)責(zé)常用轉(zhuǎn)基因和突變品系的日常維護(hù)、鑒定及資源提供服務(wù)。
胥 賢,碩士,研究助理。負(fù)責(zé)養(yǎng)殖系統(tǒng)的日常維護(hù),以及野生型品系的日常維護(hù)和提供服務(wù)等。
劉應(yīng)龍,碩士,研究助理。負(fù)責(zé)引進(jìn)品系的日常維護(hù)和鑒定,對(duì)外服務(wù)品系的鑒定等。
國(guó)際斑馬魚中心提供野生型、突變型、轉(zhuǎn)基因型等多種斑馬魚。
上海路陽(yáng)公司提供多種斑馬魚熒光蛋白激發(fā)光源,如希望提供更多詳細(xì)信息,可直接聯(lián)系上海路陽(yáng)生物技術(shù)有限公司的銷售客服。
Zebrafish
Danio rerio commonly known as the Zebrafish is a tropical fish belonging to the minnow family (Cyprinidae), commonly kept in aquaria and used for scientific research.
Zebra Danios are of no economic importance in commercial fisheries as a food fish, but very commonly known and popular in the aquarium trade.
Zebra Danios serve as a common and useful model organism for studies of vertebrate development and gene function because they reproduce very easily, passing from the egg to the larvae stage in less than three days.
For genetic research groups, the zebrafish is an excellent test subject and is used in many labs to replace or to supplement higher vertebrate models, such as rats and mice.
Danio rerio is one of the few species of fish to have been flown into space.
The zebrafish is a special animal to biologists because its body is transparent.
Aided by the transparency of the embryo, if researchers modify the fish's genotype at the egg stage they can see resulting changes in organ shape or dynamics barely three days later.
The arrival of zebrafish as a major model for studying developmental biology coincided with a large scale mutagenesis screen (commonly referred to as the Tübingen/Boston screens).